为了克服这些难题,赖良学团队直面种种挑战,通过3个步骤实施了“改造工程”。首先,利用CRISPR技术(一种基因编辑技术)改造了单细胞猪胚胎,使其缺失肾脏发育所需的两个基因,从而在猪胚胎中创造出一个空位,使人细胞不必与猪细胞竞争;其次,研究人员改造了人类多能干细胞,并将其培养成类似于早期人类胚胎细胞的“天然”细胞;最后,对人猪嵌合技术进行深度优化,将人干细胞注射入猪早期胚胎后,成功培养出了人细胞和猪细胞的嵌合体。
“我们将1820个嵌合胚胎分别移植给了13头母猪,并严格遵守相关伦理规定以及国际惯例,在25天或28天后终止妊娠并提取出这些胚胎,以评估在猪的体内是否成功产生了人源肾脏。”赖良学解释说,在提取的5个成功实现人细胞和猪细胞嵌合的胚胎中,它们具有与发育阶段对应、结构正常的肾脏,其中50%到60%的肾脏细胞都是人类细胞。
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